Spas ji bo serdana Nature.com. Guhertoya geroka ku hûn bikar tînin piştgiriya CSS-ê bi sînor e. Ji bo ezmûna çêtirîn, em pêşniyar dikin ku hûn gerokek nûvekirî bikar bînin (an jî moda lihevhatinê di Internet Explorer-ê de vemirînin). Di vê navberê de, ji bo ku piştgiriya berdewam misoger bikin, em ê malperê bêyî şêwaz û JavaScript-ê nîşan bidin.
Nanopartikulên însulînê (NP) yên bi naveroka barkirina bilind di formên dozên cûda de serîlêdanên cûda dîtine. Armanca vê xebatê ew e ku bandora pêvajoyên zuwakirina cemidî û zuwakirina bi spreyê li ser avahiya nanopartikulên kîtosan ên barkirî bi însulînê, bi an bêyî manîtol wekî krîyoparêzek, binirxîne. Me her weha kalîteya van nanopartikulan bi ji nû ve çareserkirina wan nirxand. Berî dehidratasyonê, mezinahiya perçeyên nanopartikulên girêdayî kîtosan/sodyûm trîpolîfosfat/însulînê ji bo 318 nm hate çêtirîn kirin, PDI 0.18 bû, karîgeriya kapsulkirinê 99.4% bû, û barkirin 25.01% bû. Piştî ji nû ve avakirinê, hemî nanopartikul, ji bilî yên ku bi rêbaza zuwakirina cemidî bêyî karanîna manîtol hatine hilberandin, avahiya perçeyên xwe ya sferîk parastin. Li gorî nanopartikulên ku manîtol tê de hene û bi her du spreyan hatine dehidrat kirin, nanopartikulên ku bê manîtol bi spreyê hatine zuwakirin jî mezinahiya navînî ya perçeyan a herî piçûk (376 nm) û naveroka barkirinê ya herî bilind nîşan dan. (25.02%) bi rêjeya kapsulkirinê ya wekhev (98.7%) û PDI (0.20) bi teknîkên zuwakirin an jî zuwakirina cemidî. Nanopartikulên zuwakirî bi zuwakirina bi spreyê bêyî mannitolê di heman demê de bûn sedema berdana herî bilez a însulînê û bandora herî bilind a wergirtina hucreyî. Ev xebat nîşan dide ku zuwakirina bi spreyê dikare nanopartikulên însulînê bêyî hewcedariya bi krîoparêzan li gorî rêbazên zuwakirina cemidî yên kevneşopî zuwa bike, kapasîteya barkirinê ya mezintir, hewcedariyên lêzêdekirinê yên kêmtir û lêçûnên xebitandinê avantajek girîng diafirîne.
Ji dema vedîtina wê di sala 19221,2,3 de, însulîn û amadekariyên wê yên dermanî jiyana nexweşên bi diyabetesa tîpa 1 (T1DM) û diyabetesa tîpa 2 (T1DM) xilas kirine. Lêbelê, ji ber taybetmendiyên wê wekî proteînek giraniya molekulî ya bilind, însulîn bi hêsanî tê komkirin, ji hêla enzîmên proteolîtîk ve tê hilweşandin, û bi bandora derbasbûna yekem tê rakirin. Kesên ku bi diyabetesa tîpa 1 hatine teşhîskirin ji bo mayîna jiyana xwe hewceyê derzîkirina însulînê ne. Gelek nexweşên ku di destpêkê de bi diyabetesa tîpa 2 hatine teşhîskirin jî hewceyê derzîkirina însulînê ya demdirêj in. Derzîkirina însulînê ya rojane ji bo van kesan çavkaniyek cidî ya êş û nerehetiya rojane ye, bi bandorên neyînî li ser tenduristiya derûnî. Di encamê de, formên din ên rêveberiya însulînê ku dibin sedema nerehetiya kêmtir, wekî rêveberiya însulînê ya devkî, bi berfirehî têne lêkolîn kirin5 ji ber ku ew xwedî potansiyel in ku kalîteya jiyana nêzîkî 5 mîlyar mirovên bi diyabetê re li çaraliyê cîhanê sererast bikin.
Teknolojiya nanopartikulan di hewildanên girtina însulîna devkî de pêşketinek girîng peyda kiriye4,6,7. Yek ji wan însulîna bi bandor kapsul dike û ji hilweşandinê diparêze ji bo radestkirina armanckirî bo deverên taybetî yên laş. Lêbelê, karanîna formulasyonên nanopartikulan çend sînorkirin hene, bi giranî ji ber pirsgirêkên aramiya rawestandinên perçeyan. Di dema hilanînê de dibe ku hin kombûn çêbibe, ku biyoyarariya nanopartikulên barkirî yên însulînê kêm dike8. Wekî din, divê aramiya kîmyewî ya matrîksa polîmer a nanopartikulan û însulînê jî were hesibandin da ku aramiya nanopartikulên însulînê (NP) were misoger kirin. Niha, teknolojiya zuwakirina cemidandinê standarda zêrîn e ji bo afirandina NP-yên aram dema ku pêşî li guhertinên nexwestî di dema hilanînê de digire9.
Lêbelê, zuwakirina bi cemidandinê pêdivî bi zêdekirina krîoparêzkeran heye da ku pêşî li bandora avahiya sferîk a NP-yan ji aliyê stresa mekanîkî ya krîstalên qeşayê ve bigire. Ev yek barkirina nanopartikulên însulînê piştî lîyofîlîzasyonê bi girîngî kêm dike, ji ber ku krîoparêzker piraniya rêjeya giraniyê digire. Ji ber vê yekê, NP-yên însulînê yên hilberandî pir caran ji bo çêkirina formulasyonên toza hişk, wekî tabletên devkî û fîlmên devkî, ne guncaw têne dîtin, ji ber ku hewcedariya bi mîqdarên mezin ên nanopartikulên hişk ji bo bidestxistina pencereya dermankirinê ya însulînê heye.
Hişkkirina bi spreyê pêvajoyeke pîşesaziyê ya navdar û erzan e ji bo hilberandina tozên hişk ji qonaxên şil di pîşesaziya dermanan de10,11. Kontrolkirina pêvajoya avakirina perçeyan dihêle ku çend pêkhateyên biyoaktîf bi rêkûpêk werin kapsulkirin 12, 13. Wekî din, ew ji bo amadekirina proteînên kapsulkirî ji bo rêveberiya devkî bûye teknîkek bi bandor. Di dema zuwakirina bi spreyê de, av pir zû dihele, ku ev yek dibe alîkar ku germahiya navika perçeyan kêm bimîne11,14, ku sepandina wê ji bo kapsulkirina pêkhateyên hesas ên germê gengaz dike. Berî zuwakirina bi spreyê, divê materyalê pêçandinê bi çareseriya ku pêkhateyên kapsulkirî tê de hene bi tevahî were homojenîzekirin11,14. Berevajî zuwakirina bi cemidandinê, homojenîzekirin berî kapsulkirinê di zuwakirina bi spreyê de bandora kapsulkirinê di dema dehidratasyonê de baştir dike. Ji ber ku pêvajoya kapsulkirina zuwakirina bi spreyê hewceyê krîoparêzkeran nake, zuwakirina bi spreyê dikare ji bo hilberandina NP-yên hişkkirî yên bi naveroka barkirinê ya bilind were bikar anîn.
Ev lêkolîn hilberîna NP-yên barkirî yên însulînê bi rêya girêdana xaçerê ya kîtosan û sodyûm trîpolîfosfatê bi karanîna rêbaza jela îyonî radigihîne. Jelasyona îyonê rêbazek amadekirinê ye ku dihêle nanopartikul bi rêya têkiliyên elektrostatîk di navbera du an bêtir cureyên îyonîk de di hin mercan de werin hilberandin. Hem teknîkên zuwakirina cemidî û hem jî teknîkên zuwakirina bi spreyê hatin bikar anîn da ku nanopartikulên xaçerê yên kîtosan/sodyûm trîpolîfosfat/însulînê yên çêtirkirî bêav bibin. Piştî bêavbûnê, morfolojiya wan bi SEM hate analîzkirin. Qabîliyeta wan a ji nû ve kombînasyonê bi pîvandina belavbûna mezinahiya wan, barkirina rûyê wan, PDI, karîgeriya kapsulasyonê û naveroka barkirinê hate nirxandin. Kalîteya nanopartikulên ji nû ve çareserkirî yên ku bi rêbazên bêavbûnê yên cûda hatine hilberandin jî bi berhevdana parastina wan a însulînê, tevgera berdanê û karîgeriya wergirtina hucreyî hate nirxandin.
pH-ya çareseriya tevlihev û rêjeya kîtosan û însulînê du faktorên sereke ne ku bandorê li mezinahiya perçeyan û karîgeriya kapsulkirinê (EE) ya NP-yên dawîn dikin, ji ber ku ew rasterast bandorê li pêvajoya jelasyonê ya îyonotropîk dikin. Hat nîşandan ku pH-ya çareseriya tevlihev bi mezinahiya perçeyan û karîgeriya kapsulkirinê re pir têkildar e (Wêne 1a). Wekî ku di Wêne 1a de tê xuyang kirin, her ku pH ji 4.0 ber bi 6.0 ve zêde bû, mezinahiya navînî ya perçeyan (nm) kêm bû û EE bi girîngî zêde bû, lê dema ku pH zêde bû 6.5, mezinahiya navînî ya perçeyan dest pê kir zêde bibe û EE neguherî. Her ku rêjeya kîtosanê ber bi însulînê ve zêde dibe, mezinahiya navînî ya perçeyan jî zêde dibe. Wekî din, dema ku nanopartikul bi rêjeyek girseyî ya kîtosan/însulînê ji 2.5:1 (w/w) bilindtir hatin amadekirin, di EE de ti guhertinek nehat dîtin (Wêne 1b). Ji ber vê yekê, şert û mercên amadekirina çêtirîn di vê lêkolînê de (pH 6.0, rêjeya girseyî ya kîtosan/însulînê 2.5:1) ji bo amadekirina nanopartikulên barkirî yên însulînê ji bo lêkolînên bêtir hatin bikar anîn. Di bin vê şertê amadekirinê de, mezinahiya navînî ya perçeyên nanopartikulên însulînê ji bo 318 nm hate çêtirîn kirin (Wêne 1c), PDI 0.18 bû, karîgeriya bicihkirinê 99.4%, potansiyela zeta 9.8 mv bû, û barkirina însulînê 25.01% (m2/m2) bû. Li gorî encamên mîkroskopiya elektronê ya veguhastinê (TEM), nanopartikulên çêtirkirî bi qasî sferîk û cuda bi mezinahiyek nisbeten yekreng bûn (Wêne 1d).
Optimîzasyona parametreyên nanopartikulên însulînê: (a) bandora pH-ê li ser qutra navîn û karîgeriya kapsulkirinê (EE) ya nanopartikulên însulînê (ku bi rêjeya girseyî ya 5:1 ya kîtosan û însulînê hatine amadekirin); (b) kîtosan û bandora rêjeya girseyî ya însulînê li ser qutra navîn û karîgeriya kapsulkirinê (EE) ya NP-yên însulînê (ku bi pH 6 hatine amadekirin); (c) belavbûna mezinahiya perçeyan a nanopartikulên însulînê yên optimîzkirî; (d) mîkrografiya TEM-ê ya NP-yên însulînê yên optimîzkirî.
Baş tê zanîn ku kîtosan polîelektrolîteke qels e ku pKa ya wê 6.5 e. Di navgînên asîdî de bi awayekî erênî barkirî ye ji ber ku koma wê ya amînî ya sereke ji hêla îyonên hîdrojenê ve protonîze dibe15. Ji ber vê yekê, ew pir caran wekî hilgirek ji bo dorpêçkirina makromolekulên bi barkirina neyînî tê bikar anîn. Di vê lêkolînê de, kîtosan ji bo dorpêçkirina însulînê bi xala îzoelektrîkî ya 5.3 hate bikar anîn. Ji ber ku kîtosan wekî materyalek pêçandinê tê bikar anîn, bi zêdebûna rêjeya wê re, qalindahiya qata derve ya nanopartikulan bi heman rengî zêde dibe, di encamê de mezinahiya navînî ya partîkulan mezintir dibe. Wekî din, astên bilindtir ên kîtosanê dikarin însulînê bêtir kapsul bikin. Di doza me de, EE herî zêde bû dema ku rêjeya kîtosan û însulînê gihîşt 2.5:1, û dema ku rêje zêde dibû di EE de guherînek girîng çênebû.
Ji bilî rêjeya kîtosan û însulînê, pH jî di amadekirina NP-yan de roleke girîng lîst. Gan û hevkarên wî 17 bandora pH-ê li ser mezinahiya perçeyên nanopartikulên kîtosanê lêkolîn kirin. Wan kêmbûneke berdewam di mezinahiya perçeyan de dît heta ku pH gihîşt 6.0, û zêdebûneke girîng di mezinahiya perçeyan de di pH > 6.0 de hate dîtin, ku ev yek bi çavdêriyên me re lihevhatî ye. Ev diyarde ji ber vê rastiyê ye ku bi zêdebûna pH-ê re, molekula însulînê barekî rûberî yê neyînî bi dest dixe, bi vî rengî, têkiliyên elektrostatîk bi kompleksa kîtosan/sodyûm trîpolîfosfat (TPP) re pêş dixe, ku di encamê de mezinahiya perçeyan piçûk û EE-ya bilind çêdibe. Lêbelê, dema ku pH li 6.5 hate sererast kirin, komên amînî yên li ser kîtosanê deproton bûn, ku di encamê de qatbûna kîtosan çêbû. Bi vî rengî, pH-ya bilind dibe sedema kêmtir rûbirûbûna îyonên amînî bi TPP û însulînê re, ku di encamê de girêdana xaçerêyî kêmtir, mezinahiya navînî ya dawîn a perçeyan mezintir û EE-ya kêmtir çêdibe.
Analîza taybetmendiyên morfolojîk ên NP-yên bi cemidî hişkkirî û bi spreyê hişkkirî dikare rêberiya hilbijartina teknîkên çêtir ên zuwakirin û avakirina tozê bike. Rêbaza bijarte divê îstîqrara derman, şeklê perçeyên yekreng, barkirina derman a bilind û çareseriyek baş di çareseriya orîjînal de peyda bike. Di vê lêkolînê de, ji bo berhevdana çêtir a her du teknîkan, NP-yên însulînê bi an bêyî 1% manîtol di dema zuwakirinê de hatin bikar anîn. Manîtol wekî ajanek tijîkirinê an krîoparêzker di gelek formulasyonên toza hişk de ji bo zuwakirina cemidî û zuwakirina spreyê tê bikar anîn. Ji bo nanopartikulên însulînê yên lîyofîlîzekirî bêyî manîtol, wekî ku di Şekil 2a de tê xuyang kirin, avahiyek tozê ya pir poroz bi rûberên mezin, ne rêkûpêk û xav di bin mîkroskopiya elektronê ya şopandinê (SEM) de hate dîtin. Piştî zuwakirinê çend perçeyên cihêreng di tozê de hatin tespît kirin (Şekil 2e). Van encaman nîşan dan ku piraniya NP-yan di dema zuwakirina cemidî de bêyî ti krîoparêzker hilweşiyan. Ji bo nanopartikulên însulînê yên bi cemidî hişkkirî û bi spreyê hişkkirî yên ku 1% manîtol tê de hene, nanopartikulên sferîk bi rûberên nerm hatin dîtin (Şekil 2e). 2b,d,f,h).Nanopartîkên însulînê yên bê manîtol bi spreyê hişkkirî gilover man lê li ser rûyê wan çirç bû (Wêne 2c).Rûyên gilover û çirç di testên tevgera berdanê û wergirtina hucreyî yên li jêr de bêtir têne nîqaş kirin.Li gorî xuyangê xuya yê NP-yên hişkkirî, hem NP-yên bê manîtol bi spreyê hişkkirî û hem jî NP-yên bi cemidandinê hişkkirî û bi manîtolê hişkkirî tozên NP-yên nazik çêkirin (Wêne 2f,g,h).Çiqas rûbera di navbera rûyên perçeyan de mezintir be, çareserî jî bilindtir dibe û ji ber vê yekê rêjeya berdanê jî bilindtir dibe.
Morfolojiya NP-yên însulînê yên zuhakirî yên cuda: (a) Wêneya SEM ya NP-yên însulînê yên lîyofîlîzekirî bê manîtol; (b) Wêneya SEM ya NP-yên însulînê yên lîyofîlîzekirî bi manîtol; (c) NP-yên însulînê yên bi spreyê hişkkirî bê manîtol Wêneya SEM ya ; (d) Wêneya SEM ya NP-yên însulînê yên bi spreyê hişkkirî bi manîtol; (e) Wêneya toza NP-yên însulînê yên lîyofîlîzekirî bê manîtol; (f) Wêneya NP-yên însulînê yên lîyofîlîzekirî bi manîtol; (g) Wêneya toza NP-yên însulînê yên bi spreyê hişkkirî bê manîtol; (h) Wêneya toza NP-yên însulînê yên bi spreyê hişkkirî bi manîtol.
Di dema zuwakirina bi cemidandinê de, manîtol wekî krîoparêzek tevdigere, NP-yan di şiklê amorf de dihêle û zirara ji hêla krîstalên qeşayê ve asteng dike19. Berevajî vê, di dema zuwakirina bi spreyê de gaveke cemidandinê tune. Ji ber vê yekê di vê rêbazê de manîtol ne hewce ye. Bi rastî, NP-yên bi spreyê zuwakirî bêyî manîtol NP-yên ziravtir dan wekî ku berê hatiye vegotin. Lêbelê, manîtol hîn jî dikare di pêvajoya zuwakirina bi spreyê de wekî tijîker tevbigere da ku avahiyek sferîktir bide NP-yan20 (Wêne 2d), ku dibe alîkar ku tevgera berdana yekreng a NP-yên kapsulkirî yên weha were bidestxistin. Wekî din, eşkere ye ku hin perçeyên mezin dikarin hem di NP-yên însulînê yên bi cemidandinê zuwakirî û hem jî yên bi spreyê zuwakirî yên ku manîtol dihewînin de werin tespît kirin (Wêne 2b,d), ku dibe ku ji ber kombûna manîtolê di navika perçeyê de bi însulîna kapsulkirî re be. Qata kîtosanê. Hêjayî gotinê ye ku di vê lêkolînê de, ji bo ku piştî zuwabûnê avahiya sferîk sax bimîne, rêjeya manîtol û kîtosanê di 5:1 de tê girtin, da ku mîqdarek mezin ji dagirtinê dikare mezinahiya perçeyên NP-yên hişkkirî jî mezin bike..
Spektroskopiya refleksa tevahî ya kêmkirî ya înfrared a veguherîna Fourier (FTIR-ATR) tevliheviya fîzîkî ya însulîna azad, kîtosan, kîtosan, TPP û însulînê nîşan da. Hemî NP-yên zuwabûyî bi karanîna spektroskopiya FTIR-ATR hatin nîşankirin. Bi taybetî, şîdeta bendê ya 1641, 1543 û 1412 cm-1 di NP-yên kapsulkirî yên bi manîtolê hatine cemidandin û di NP-yên bi spreyê yên bi û bê manîtolê hatine zuwakirin de hatin dîtin (Wêne 3). Wekî ku berê hatibû ragihandin, ev zêdebûna hêzê bi girêdana xaçerêyî di navbera kîtosan, TPP û însulînê de ve girêdayî bû. Lêkolîna têkiliya di navbera kîtosan û însulînê de nîşan da ku di spektrumên FTIR ên nanopartikulên kîtosanê yên bi însulînê barkirî de, benda kîtosanê bi ya însulînê re li hev diket, şîdeta karbonîl (1641 cm-1) û kembera amîn (1543 cm-1) zêde dike. Komên trîpolîfosfat ên TPP bi komên amonyûmê di kîtosanê de ve girêdayî ne, ava dikin. benda li 1412 cm-1.
Spektrên FTIR-ATR yên însulîna azad, kîtosan, tevliheviyên fîzîkî yên kîtosan/TPP/însulîn û NP-yên ku bi rêbazên cûda hatine zuhakirin.
Herwiha, ev encam bi yên ku di SEMê de hatine nîşandan re lihevhatî ne, ku nîşan da ku NP-yên kapsulkirî hem dema ku bi manîtol hatine sprekirin û hem jî dema ku bi cemidî hatine zuwakirin sax mane, lê di nebûna manîtol de, tenê zuwakirina bi spreyê perçeyên kapsulkirî hilberandin. Berevajî vê, encamên spektral ên FTIR-ATR yên NP-yên bêyî manîtol hatine cemidîkirin pir dişibin tevliheviya fîzîkî ya kîtosan, TPP û însulînê. Ev encam nîşan dide ku girêdanên xaçerêyî yên di navbera kîtosan, TPP û însulînê de êdî di NP-yên bêyî manîtol hatine cemidîkirin de tune ne. Avahiya NP-yan di dema zuwakirina bi cemidîkirin bêyî krîoparêzker de hate hilweşandin, ku ev yek di encamên SEMê de dikare were dîtin (Wêne 2a). Li gorî morfolojî û encamên FTIR yên NP-yên însulînê yên zuwakirî, tenê NP-yên lîyofîlîzekirî, zuwakirî bi spreyê û bê manîtol ji bo ceribandinên ji nû ve avakirinê û NP-yên bê manîtol ji ber hilweşîna NP-yên bê manîtol di dema zuwakirinê de hatine bikar anîn. nîqaş bikin.
Dehîdratasyon ji bo hilanîna demdirêj û ji nû ve hilberandina bo formulasyonên din tê bikar anîn. Şîyana NP-yên hişk ji bo ji nû ve avakirina piştî hilanînê ji bo karanîna wan di formulasyonên cûda de wekî tablet û fîliman girîng e. Me dît ku mezinahiya navînî ya perçeyên NP-yên însulînê yên bi spreyê hişkkirî di nebûna manîtolê de piştî ji nû ve avakirinê tenê hinekî zêde bû. Ji hêla din ve, mezinahiya perçeyên nanopartikulên însulînê yên bi spreyê hişkkirî û cemidî hişkkirî bi manîtolê re bi girîngî zêde bû (Tabloya 1). PDI û EE piştî ji nû ve kombînasyona hemî NP-yan di vê lêkolînê de bi girîngî neguherîn (p > 0.05) (Tabloya 1). Ev encam nîşan dide ku piraniya perçeyan piştî ji nû ve çareserkirinê sax man. Lêbelê, lêzêdekirina manîtolê bû sedema kêmkirina barkirina însulînê ya nanopartikulên manîtolê yên lîyofîlîzekirî û bi spreyê hişkkirî (Tabloya 1). Berevajî vê, naveroka barê însulînê ya NP-yên bi spreyê hişkkirî bêyî manîtolê wekî berê ma (Tabloya 1).
Baş tê zanîn ku barkirina nanopartikulan dema ku ji bo armancên radestkirina dermanan tê bikar anîn girîng e. Ji bo NP-yên bi barkirinên kêm, ji bo gihîştina asta dermankirinê gelek materyal hewce ne. Lêbelê, vîskozîteya bilind a konsantrasyonên NP-yên ewqas bilind bi rêzê ve dibe sedema nerehetî û dijwarîyê di rêveberiya devkî û formulasyonên derzîkirî de 22. Wekî din, NP-yên însulînê dikarin ji bo çêkirina tablet û biyofîlmên vîskoz jî werin bikar anîn 23, 24, ku hewceyê karanîna mîqdarên mezin ên NP-yan di astên barkirina kêm de dike, di encamê de tabletên mezin û biyofîlmên stûr çêdibin ku ji bo serîlêdanên devkî ne guncaw in. Ji ber vê yekê, NP-yên bêavkirî yên bi barkirina însulînê ya bilind pir xwestî ne. Encamên me destnîşan dikin ku barkirina însulînê ya bilind a NP-yên bê manîtol ên bi spreyê hişkkirî dikare ji bo van rêbazên radestkirina alternatîf gelek avantajên balkêş pêşkêş bike.
Hemû NP-yên bêavkirî sê mehan di sarincê de hatin hilanîn. Encamên SEM nîşan dan ku morfolojiya hemû NP-yên bêavkirî di dema hilanîna sê mehan de bi awayekî girîng neguheriye (Wêne 4). Piştî ji nû ve avakirina di avê de, hemû NP-yan di EE-yê de kêmbûnek sivik nîşan dan û di dema hilanîna sê mehan de bi qasî mîqdarek piçûk (~%5) însulînê berdan (Tabloya 2). Lêbelê, mezinahiya navînî ya perçeyên hemû nanopartikulan zêde bû. Mezinahiya perçeyên NP-yên ku bêyî manîtolê bi spreyê hişk bûne zêde bû û gihîşt 525 nm, di heman demê de ya NP-yên bi spreyê hişk û yên bi cemidandinê hişkbûyî yên bi manîtolê zêde bû û gihîşt 872 û 921 nm (Tabloya 2).
Morfolojiya NP-yên însulînê yên zuhakirî yên cuda ku ji bo sê mehan hatine hilanîn: (a) wêneya SEM ya NP-yên însulînê yên lîyofîlîzekirî bi manîtolê; (b) wêneya SEM ya nanopartikulên însulînê yên bi spreyê hişkkirî bêyî manîtolê; (c) bêyî manîtol wêneyên SEM yên NP-yên însulînê yên bi spreyê hişkkirî.
Her wiha, di nanopartikulên însulînê yên ji nû ve hatine çêkirin de ku bi manîtolê hatine zuwakirin û bi cemidandinê hatine zuwakirin (Wêne S2) bermayî hatin dîtin. Ev dibe ku ji ber ku perçeyên mezin bi rêkûpêk di nav avê de nahelin çêbibe. Hemû encamên jorîn nîşan didin ku teknîka zuwakirina bi spreyê dikare nanopartikulên însulînê ji zuwabûnê biparêze û barkirinên bilind ên nanopartikulên însulînê bêyî ti dagirtin an krîoparêzkeran dikarin werin bidestxistin.
Ragirtina însulînê di navgîna pH = 2.5 de bi pepsîn, trîpsîn, û α-kîmotrîpsîn hate ceribandin da ku şiyana parastinê ya NP-yan li dijî helandina enzîmatîk piştî dehidratasyonê were nîşandan. Ragirtina însulînê ya NP-yên dehidratkirî bi ya NP-yên nû amadekirî re hate berhev kirin, û însulîna azad wekî kontrolek neyînî hate bikar anîn. Di vê lêkolînê de, însulîna azad di nav her sê dermankirinên enzîmatîk de di nav 4 demjimêran de tasfiyekirina însulînê ya bilez nîşan da (Wêne 5a-c). Berevajî vê, ceribandina tasfiyekirina însulînê ya NP-yên bi manîtolê hatine hişkkirin û NP-yên bi spreyê hişkkirî bi an bê manîtolê re parastinek pir bilindtir a van NP-yan li dijî helandina enzîmatîk nîşan da, ku dişibiya ya NP-yên însulînê yên nû amadekirî (wêne 1).5a-c). Bi alîkariya nanopartikulên di pepsîn, trîpsîn, û α-kîmotrîpsînê de, ji %50, %60 û %75 zêdetir însulîn dikare di nav 4 demjimêran de were parastin (Wêne 5a-c). Ev şiyana parastina însulînê dikare şansê vegirtina însulînê ya bilindtir di nav laş de zêde bike. xwînê25. Ev encam nîşan didin ku zuwakirina bi spreyê bi manîtol an bê manîtol û zuwakirina bi cemidandinê bi manîtol dikare şiyana parastina însulînê ya NP-yan piştî dehidratasyonê biparêze.
Parastin û reftara berdana NP-yên însulînê yên bêav: (a) parastina însulînê di çareseriya pepsînê de; (b) parastina însulînê di çareseriya trîpsînê de; (c) parastina însulînê bi çareseriya α-kîmotrîpsînê; (d) Reftara berdana NP-yên bêav di çareseriya pH = 2.5 de; (e) Reftara berdana NP-yên bêav di çareseriya pH = 6.6 de; (f) Reftara berdana NP-yên bêav di çareseriya pH = 7.0 de.
NP-yên însulînê yên hişk ên teze amadekirî û ji nû ve hatine çêkirin di 37°C de di nav tamponên cûrbecûr (pH = 2.5, 6.6, 7.0) de hatin înkubasyon kirin, bi vî rengî jîngeha pH-ê ya mîde, duodenum û rûviya piçûk a jorîn simulasyon kirin, da ku bandora însulînê li ser berxwedana însulînê were lêkolîn kirin. Reftara berdanê di jîngehên cuda de. Parçeya rêça gastrointestinal. Di pH = 2.5 de, NP-yên barkirî bi însulînê û NP-yên însulîna hişk ên ji nû ve çareserkirî di nav saetekê de berdanek teqîner a destpêkê nîşan dan, û piştre di 5 saetên din de berdanek hêdî hate kirin (Wêne 5d). Ev berdana bilez di destpêkê de bi îhtîmaleke mezin encama desorpsiyona bilez a rûberî ya molekulên proteînê ye ku di avahiya navxweyî ya perçeyê de bi tevahî ne sabît in. Di pH = 6.5 de, NP-yên barkirî bi însulînê û NP-yên însulîna hişk ên ji nû ve hatine çêkirin di nav 6 demjimêran de berdanek nerm û hêdî nîşan dan, ji ber ku pH-ya çareseriya ceribandinê dişibiya ya çareseriya ku ji bo NP-yan hatiye amadekirin (Wêne 5e). Di pH = 7 de, NP nearam bûn û di nav du saetên pêşîn de hema hema bi tevahî hilweşiyan (Wêne 5f). Ev ji ber ku deprotonasyona kîtosanê di pH-ya bilindtir de çêdibe, ku dibe sedema toreke polîmer a kêmtir kompakt û berdana însulîna barkirî.
Wekî din, NP-yên însulînê yên ku bêyî manîtolê bi spreyê hatine zuwakirin, profîla berdana zûtir ji NP-yên din ên bêavkirî nîşan dan (Wêne 5d-f). Wekî ku berê hatiye vegotin, NP-yên însulînê yên ji nû ve hatine çêkirin ên ku bêyî manîtolê hatine zuwakirin, mezinahiya perçeyan a herî piçûk nîşan dan. Perçeyên piçûk rûberek mezintir peyda dikin, ji ber vê yekê piraniya dermanê têkildar dê li ser an nêzîkî rûyê perçeyan be, ku di encamê de berdana dermanê bilez çêdibe26.
Sîtototoksîsîteya NP-yan bi ceribandina MTT-ê hate lêkolînkirin. Wekî ku di Şekil S4-ê de tê nîşandan, hat dîtin ku hemî NP-yên bêavkirî di rêjeyên 50-500 μg/ml de bandorek girîng li ser zindîbûna şaneyan nakin, ev yek nîşan dide ku hemî NP-yên bêavkirî dikarin bi ewlehî werin bikar anîn da ku bigihîjin pencereya dermankirinê.
Kezeb organa sereke ye ku însulîn fonksiyonên xwe yên fîzyolojîk bi rêya wê pêk tîne. Hucreyên HepG2 xêzek hucreya hepatoma ya mirovan e ku bi gelemperî wekî modelek wergirtina hepatosîtê ya in vitro tê bikar anîn. Li vir, hucreyên HepG2 ji bo nirxandina wergirtina hucreyî ya NP-yên bêavkirî bi karanîna rêbazên zuwakirina cemidandinê û zuwakirina bi spreyê hatin bikar anîn. Wergirtina hucreyî bi şopandina lazerê konfokal bi karanîna sîtometrîya herikînê û dîtinê piştî çend demjimêran înkubasyonê bi însulîna FITC ya azad re di konsantrasyona 25 μg/mL de, NP-yên însulîn-barkirî yên FITC yên teze amadekirî û NP-yên însulîn-barkirî yên FITC yên bêavkirî di konsantrasyonên însulînê yên wekhev de. Çavdêriyên mîkroskopiya hejmarî (CLSM) hatin kirin. NP-yên lîyofîlîzekirî bê manîtol di dema bêavkirinê de hatin hilweşandin û di vê ceribandinê de nehatin nirxandin. Şiddeta fluoresansa navxaneyî ya NP-yên însulîn-barkirî yên teze amadekirî, NP-yên lîyofîlîzekirî bi manîtol, û NP-yên bi spreyê zuwakirî bi û bê manîtol (Wêne 6a) 4.3, 2.6, 2.4, û 4.1 qat ji yên azad bilindtir. Koma FITC-însulînê, bi rêzê ve (Wêne 6b). Ev encam nîşan didin ku însulîna kapsulkirî di wergirtina hucreyî de ji însulîna azad bihêztir e, bi giranî ji ber mezinahiya piçûktir a nanopartikulên barkirî yên însulînê yên di lêkolînê de hatine hilberandin.
Vegirtin ji hêla hucreyên HepG2 ve piştî înkubasyona 4 demjimêran bi NP-yên nû amadekirî û NP-yên bêav: (a) Belavbûna vegirtin ji hêla hucreyên HepG2 ve ya FITC-însulînê. (b) Navîniya geometrîk a şîdeta fluoresansê ku bi sîtometriya herikînê ve hatî analîzkirin (n = 3), *P < 0.05 li gorî însulîna azad.
Bi heman awayî, wêneyên CLSM nîşan dan ku şîdeta fluoresansa FITC ya NP-yên barkirî bi FITC-însulîn ên nû amadekirî û NP-yên hişkkirî yên bi spreyê barkirî bi FITC-însulîn (bêyî mannitol) ji yên nimûneyên din pir bihêztir bûn (Wêne 6a). Wekî din, bi zêdekirina mannitolê, vîskozîteya bilindtir a çareseriyê berxwedana li hember vegirtina hucreyî zêde kir, ku di encamê de zêdebûna însulînê kêm bû. Ev encam nîşan didin ku NP-yên hişkkirî yên bê mannitol bandora herî bilind a vegirtina hucreyî nîşan dan ji ber ku mezinahiya perçeyên wan piştî ji nû ve helandinê ji ya NP-yên hişkkirî yên cemidî piçûktir bû.
Kîtosan (giraniya molekulî ya navînî 100 KDa, %75–85 deasetilkirî) ji Sigma-Aldrich (Oakville, Ontario, Kanada) hat kirîn. Sodyûm trîpolîfosfat (TPP) ji VWR (Radnor, Pennsylvania, DYA) hat kirîn. Însulîna mirovî ya rekombinant a ku di vê lêkolînê de hat bikar anîn ji Fisher Scientific (Waltham, MA, DYA) bû. Însulîna mirovî ya bi fluorescein isothiocyanate (FITC) nîşankirî û 4′,6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride (DAPI) ji Sigma-Aldrich (Oakville, Ontario, Kanada) hatin kirîn. Xeta şaneya HepG2 ji ATCC (Manassas, Virginia, DYA) hat wergirtin. Hemû reagentên din ên pola analîtîk an kromatografîk bûn.
Çareseriya CS ya 1 mg/ml bi helandina wê di ava ducarî distilkirî (ava DD) de ku 0.1% asîda asetîk tê de heye amade bikin. Çareseriyên 1 mg/ml yên TPP û însulînê bi helandina wan di ava DD û 0.1% asîda asetîk de amade bikin. Pêş-emulsiyon bi homojenîzatorek bilez a polytron PCU-2-110 (Brinkmann Ind. Westbury, NY, USA) hate amadekirin. Pêvajoya amadekirinê wiha ye: pêşî, 2 ml çareseriya TPP li 4 ml çareseriya însulînê tê zêdekirin, û tevlihevî 30 hûrdeman tê tevlihevkirin û bi tevahî tê tevlihevkirin. Dûv re, çareseriya tevlihev bi rêya şîrîngehekê di bin tevdana bilez (10,000 rpm) de bi dilopan li çareseriya CS tê zêdekirin. Tevlihev di bin tevdana bilez (15,000 rpm) de 30 hûrdeman di serşokek qeşayê de hatin girtin, û ew li gorî pH-ek diyarkirî hatin verastkirin da ku NP-yên însulînê yên xaçerêkirî werin bidestxistin. Ji bo ku bêtir homojenîzekirin û mezinahiya perçeyên NP-yên însulînê kêm bikin, ew ji bo 30 hûrdemên din hatin sonîkkirin. di serşokek qeşayê de bi karanîna sonîkatorek celebê probê (UP 200ST, Hielscher Ultrasonics, Teltow, Almanya).
NPS-yên însulînê ji bo pîvandina belavbûna ronahiya dînamîk (DLS) bi karanîna Litesizer 500 (Anton Paar, Graz, Avusturya) bi şilkirina wan di ava DD de di 25°C de ji bo diametera Z-navîn, endeksa polîdispersîteyê (PDI) û potansiyela zeta hatin ceribandin. Morfolojî û belavkirina mezinahiyê bi mîkroskopa elektronê ya veguheztina Hitachi H7600 (TEM) (Hitachi, Tokyo, Japonya) hatin taybetmendîkirin, û wêne paşê bi karanîna nermalava wênekêşiyê ya Hitachi (Hitachi, Tokyo, Japonya) hatin analîzkirin. Ji bo nirxandina karîgeriya kapsulkirinê (EE) û kapasîteya barkirinê (LC) ya NP-yên însulînê, NP hatin pîpetkirin nav lûleyên ultrafîltrasyonê bi qutkirina giraniya molekulî ya 100 kDa û bi 500 xg ji bo 30 hûrdeman hatin santrifûjkirin. Însulîna nekapsulkirî di fîltratê de bi karanîna pergala HPLC ya Agilent 1100 Series (Agilent, Santa Clara, California, USA) ku ji pompeyek çaremîn, oto-nimûneyek, germkerek stûnê, û pêk tê, hate hejmartin. Detektora DAD. Însulîn bi stûneke C18 (Zorbax, 3.5 μm, 4.6 mm × 150 mm, Agilent, USA) hate analîzkirin û di 214 nm de hate tespîtkirin. Qonaxa mobîl asetonîtrîl û av bû, ku tê de 0.1% TFA hebû, rêjeyên gradyantê ji 10/90 heta 100/0 bûn, û 10 deqîqeyan hate xebitandin. Qonaxa mobîl bi rêjeya herikîna 1.0 ml/min hate pompekirin. Germahiya stûnê li ser 20 °C hate danîn. Rêjeyên EE û LC bi karanîna hevkêşeyên (1) û Hevkêşeya (2) hesab bikin.
Ji bo baştirkirina NP-yên însulînê, rêjeyên cûrbecûr ên CS/însulînê yên ji 2.0 heta 4.0 hatin ceribandin. Di dema amadekirinê de, mîqdarên cûda yên çareseriya CS hatin zêdekirin, di heman demê de tevliheviya însulîn/TPP sabît ma. NP-yên însulînê di navbera pH-ya 4.0 heta 6.5 de bi kontrolkirina bi baldarî ya pH-ya tevliheviyê piştî zêdekirina hemî çareseriyan (însulîn, TPP û CS) hatin amadekirin. EE û mezinahiya perçeyên nanopartikulên însulînê di nirxên pH û rêjeyên giraniya CS/însulînê yên cûda de hatin nirxandin da ku çêbûna NP-yên însulînê baştir bibe.
NP-yên însulînê yên çêtirkirî li ser konteynirek alumînyûmê hatin danîn û bi destmalek ku bi bantê hatibû tengkirin hatin pêçandin. Piştre, konteynirên pêçayî di zuwakerek cemidandinê ya Labconco FreeZone (Labconco, Kansas City, MO, USA) de hatin danîn ku bi zuwakerek tepsiyê ve hatibû sazkirin. Germahî û zexta valahiyê li -10°C, 0.350 Torr ji bo 2 saetên pêşîn, û 0°C û 0.120 Torr ji bo 22 saetên mayî yên 24 saetên din hatin danîn da ku NP-yên însulînê yên hişk werin bidestxistin.
Ji bo çêkirina însulîna kapsulkirî, Buchi Mini Spray Dryer B-290 (BÜCHI, Flawil, Swîsre) hate bikar anîn. Parametreyên zuwakirinê yên bijartî ev bûn: germahî 100 °C, herikîna xwarinê 3 L/min, û herikîna gazê 4 L/min.
Nanopartikulên însulînê berî û piştî dehidratasyonê bi karanîna spektroskopiya FTIR-ATR hatin destnîşankirin. Nanopartikulên dehidratkirî û her weha însulîn û kîtosanê azad bi karanîna spektrofotometreyek Spectrum 100 FTIR (PerkinElmer, Waltham, Massachusetts, USA) ku bi aksesûarek nimûnegirtina ATR ya gerdûnî (PerkinElmer, Waltham, Massachusetts, USA) ve hatî çêkirin, hatin analîzkirin. Navînîyên sînyalan ji 16 skankirinan bi çareseriya 4 cm2 di rêza frekansê ya 4000-600 cm2 de hatin bidestxistin.
Morfolojiya NP-yên însulînê yên hişk bi wêneyên SEM-ê yên NP-yên însulînê yên bi cemidandin û bi spreyê hişkkirî yên ku ji hêla Mîkroskopa Elektronîkî ya Skenkirina Tîrêjên Îyonê ya Helios NanoLab 650 (FIB-SEM) (FEI, Hillsboro, Oregon, USA) ve hatine girtin, hate nirxandin. Parametreya sereke ya ku hate bikar anîn voltaja 5 keV û herika 30 mA bû.
Hemû NP-yên însulînê yên bêavkirî di ava dd de ji nû ve hatin çareserkirin. Mezinahiya perçeyan, PDI, EE û LC dîsa bi karanîna heman rêbaza ku berê hatî behs kirin hatin ceribandin da ku kalîteya wan piştî bêavkirinê were nirxandin. Aramiya NP-yên bêavkirî jî bi ceribandina taybetmendiyên NP-yan piştî hilanîna dirêj hate pîvandin. Di vê lêkolînê de, hemû NP piştî bêavkirinê sê mehan di sarincê de hatin hilanîn. Piştî sê mehan hilanînê, NP ji bo mezinahiya perçeyên morfolojîk, PDI, EE û LC hatin ceribandin.
Ji bo nirxandina bandora însulînê di parastina NP-yan piştî dehidratasyonê de, 5 mL NP-yên ji nû ve hatine çêkirin di 45 mL de ku şilava mîdeyê ya simulasyonkirî (pH 1.2, ku %1 pepsîn tê de heye), şilava rûvî (pH 6.8, ku %1 trîpsîn tê de heye) an çareseriya kîmotrîpsînê (100 g/mL, di tampona fosfatê de, pH 7.8) tê de heye, bihelînin. Ew di 37°C de bi leza tevlihevkirinê ya 100 rpm hatin înkubasyonkirin. 500 μL ji çareseriyê di demên cûda de hat berhevkirin û konsantrasyona însulînê bi HPLC hat destnîşankirin.
Reftara berdana in vitro ya nanopartikulên însulînê yên nû amadekirî û zuhakirî bi rêbaza kîsika diyalîzê (kêmkirina giraniya molekulî 100 kDa, Spectra Por Inc.) hate ceribandin. Nanopartikulên hişk ên nû amadekirî û ji nû ve hatine çêkirin, di şilekan de bi pH 2.5, pH 6.6, û pH 7.0 (0.1 M şorba tamponkirî ya fosfatê, PBS) hatin diyalîzekirin da ku hawîrdora pH ya mîde, duodenum, û rûviya piçûk a jorîn simulasyon bikin. Hemû nimûne di 37 °C de bi hejandina domdar a 200 rpm hatin înkubasyonkirin. Şileya li derveyî kîsika diyalîzê ya 5 mL di demên jêrîn de bihelînin: 0.5, 1, 2, 3, 4, û 6 demjimêran, û tavilê bi diyalîzata teze tijî bikin. Gemarîbûna însulînê di şileyê de bi HPLC hate analîzkirin, û rêjeya berdana însulînê ji nanopartikulan ji rêjeya însulîna azad a ku hatî berdan û însulîna tevahî ya ku di nanopartikulan de hatiye kapsulkirin hate hesabkirin (Hevkêşeya 3).
Xaneyên HepG2 yên xeta xaneya karsînoma hucreya kezebê ya mirovan, di taseyên bi qûtra 60 mm de bi karanîna Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) ku 10% seruma fetal a ga, 100 IU/mL penisîlîn û 100 μg/mL streptomîsîn29 tê de heye, hatin mezin kirin. Çand di 37°C, 95% şilbûna nisbî û 5% CO2 de hatin parastin. Ji bo ceribandinên kişandinê, xaneyên HepG2 bi rêjeya 1 × 105 xane/ml li ser pergala slaytê ya odeya Nunc Lab-Tek a 8-qulî (Thermo Fisher, NY, USA) hatin çandin. Ji bo ceribandinên sîtotoksîsîteyê, ew di nav plakayên 96-qulî de (Corning, NY, USA) bi dendika 5 × 104 xane/ml hatin çandin.
Ceribandina MTT ji bo nirxandina sîtotoksîsîteya NP-yên însulînê yên nû amadekirî û bêavkirî30 hate bikar anîn. Hucreyên HepG2 di plakayên 96-qulî de bi dendika 5 × 104 hucre/mL hatin çandin û berî ceribandinê 7 rojan hatin çandin. NP-yên însulînê di navgîna çandiniyê de heta konsantrasyonên cûda (50 heta 500 μg/mL) hatin şilkirin û dûv re li hucreyan hatin dayîn. Piştî 24 demjimêran înkubasyonê, hucre 3 caran bi PBS hatin şuştin û bi navgînek ku 0.5 mg/ml MTT tê de heye ji bo 4 demjimêrên din hatin înkubasyonkirin. Sîtotoksîsîtî bi pîvandina kêmkirina enzîmatîk a MTT-ya tetrazolium zer bo formazana binefşî li 570 nm bi karanîna xwendevana plakaya spektrofotometre ya Tecan infinite M200 pro (Tecan, Männedorf, Swîsre) hate nirxandin.
Karîgeriya wergirtina hucreyî ya NP-yan bi mîkroskopiya şopandina lazer a konfokal û analîza sîtometriya herikînê hate ceribandin. Her qulika pergala slaytê ya odeya Nunc Lab-Tek bi însulîna FITC ya azad, NP-yên barkirî yên FITC-însulîn hate dermankirin, û 25 μg/mL NP-yên FITC-însulîna bêav di heman konsantrasyonê de ji nû ve hate çêkirin û 4 demjimêran hate înkubasyonkirin. Hucre 3 caran bi PBS hatin şuştin û bi 4% paraformaldehîdê hatin sabît kirin. Navik bi 4′,6-dîamîdîno-2-fenîlîndol (DAPI) hatin boyaxkirin. Cihê însulînê bi karanîna mîkroskopa konfokal a şopandina lazer/du-foton a Olympus FV1000 (Olympus, Bajarê Shinjuku, Tokyo, Japonya) hate çavdêrîkirin. Ji bo analîza sîtometriya herikînê, heman konsantrasyonên 10 μg/mL însulîna FITC ya azad, NP-yên barkirî yên FITC-însulîn, û NP-yên FITC-însulîna bêav ên ji nû ve çareserkirî li ... hatin zêdekirin. Plaqeyên 96-qulî bi şaneyên HepG2 hatin çandin û 4 saetan hatin înkubasyonkirin. Piştî 4 saetan înkubasyonê, şane hatin derxistin û 3 caran bi FBS hatin şuştin. 5 × 104 şaneyên ji bo her nimûneyê bi sîtometreya herikînê ya BD LSR II (BD, Franklin Lakes, New Jersey, Dewletên Yekbûyî yên Amerîkayê) hatin analîzkirin.
Hemû nirx wekî navînî ± devîasyona standard têne îfade kirin. Berawirdkirinên di navbera hemû koman de bi karanîna ANOVA-ya yekalî an testa t-yê ji hêla IBM SPSS Statistics 26 for Mac (IBM, Endicott, New York, USA) ve hatin nirxandin û p < 0.05 wekî girîng a îstatîstîkî hate hesibandin.
Ev lêkolîn nermbûn û şiyana zuwakirina bi spreyê ji bo zuwakirina nanopartikulên kîtosan/TPP/însulînê yên girêdayî-xaçerê bi veavakirinek çêtir li gorî rêbazên zuwakirina cemidî-cemidî yên standard bi karanîna ajanên tijîkirinê an kapasîteya parastina krîyo û kapasîteya barkirinê ya bilindtir nîşan dide. Nanopartikulên însulînê yên çêtirkirî mezinahiya navînî ya partîkulan 318 nm û karîgeriya kapsulkirinê 99.4% dan. Encamên SEM û FTIR piştî zuwakirinê nîşan dan ku avahiya sferîk tenê di NP-yên bi spreyê zuwakirî yên bi û bê manîtol û bi manîtolê lîyofîlîzekirî de hate parastin, lê NP-yên lîyofîlîzekirî bêyî manîtol di dema zuwakirinê de hatin hilweşandin. Di testa şiyana veavakirinê de, nanopartikulên însulînê yên bi spreyê zuwakirî bêyî manîtol mezinahiya navînî ya partîkulan a herî piçûk û barkirina herî bilind di dema veavakirinê de nîşan dan. Reftarên berdanê yên hemî van NP-yên zuwakirî nîşan dan ku ew di çareseriyên pH = 2.5 û pH = 7 de bi lez hatin berdan, û di çareseriya pH = 6.5 de pir stabîl bûn. Li gorî NP-yên zuwakirî yên din ên ji nû ve çareserkirî, NP-yên ku bê manîtol bi spreyê hatine zuwakirin, berdana herî bilez nîşan dan. Ev encam bi ya ku di ceribandina vegirtina hucreyî de hatiye dîtin re lihevhatî ye, ji ber ku NP-yên ku bi spreyê hatine zuwakirin di nebûna manîtol de hema hema bi tevahî bandora vegirtina hucreyî ya NP-yên nû amadekirî parastine. Ev encam nîşan didin ku nanopartikulên însulînê yên hişk ên ku bi zuwakirina spreyê ya bê manîtol hatine amadekirin, ji bo pêvajoya bêtir bo formên dozên din ên bêav, wek tabletên devkî an fîlmên biyoadhezîv, herî guncaw in.
Ji ber pirsgirêkên milkê rewşenbîrî, setên daneyên ku di dema vê lêkolînê de hatine çêkirin û/an analîzkirin, ji bo raya giştî ne berdest in, lê li ser daxwazek maqûl ji nivîskarên têkildar peyda dibin.
Kagan, A. Diyabetesa Tîpa 2: kokên civakî û zanistî, tevliheviyên bijîşkî, û bandorên wê ji bo nexweşan û yên din. (McFarlane, 2009).
Singh, AP, Guo, Y., Singh, A., Xie, W. & Jiang, P. Pêşxistina kapsulkirina însulînê: gelo niha rêveberiya devkî mimkun e? J. Pharmacy.bio-pharmacy.reservoir.1, 74–92 (2019).
Wong, CY, Al-Salami, H. & Dass, CR Pêşketinên dawî di pergalên radestkirina lîpozomên bi însulînê barkirî yên devkî de ji bo dermankirina şekir. Şîrovekirin.J. Pharmacy.549, 201–217 (2018).